濕熱滅菌如何保證滅菌的有效和均一性

時(shí)間：2015-12-22 10:33:47

常用的滅菌方法有濕熱滅菌法、干熱滅菌法、氣體滅菌法、輻射滅菌法和過(guò)濾除菌法?？筛鶕粶缇锲返奶匦圆捎靡环N或多種方法組合滅菌。只要產(chǎn)品允許，應盡可能選用最終滅菌法（即產(chǎn)品分裝至包裝容器后再滅菌）滅菌。若產(chǎn)品不適合采用最終滅菌法，可選用過(guò)濾除菌法或無(wú)菌生產(chǎn)工藝達到無(wú)菌保證要求，只要可能，應對非最終滅菌的產(chǎn)品作補充性滅菌處理（如流通蒸汽滅菌）。
（一）濕熱滅菌法
本法系指將物品置于滅菌柜內利用高壓飽和蒸汽、過(guò)熱水噴淋等手段使微生物菌體中的蛋白質(zhì)、核酸發(fā)生變性而殺滅微生物的方法。該法滅菌能力強，為熱力滅菌中有效、應用廣泛的滅菌方法。藥品、容器、培養基、無(wú)菌衣、膠塞以及其他遇高溫和潮濕不發(fā)生變化或損壞的物品，均可用本法滅菌。流通蒸汽不能完全殺滅細菌孢子，一般可作為不耐熱無(wú)菌產(chǎn)品的輔助滅菌手段。
濕熱滅菌條件通常采用121℃*15min、121℃*15min或116℃*40min的程序，也可采用其他溫度和時(shí)間參數?？傊?，必須保證對熱穩定的物品，可采用過(guò)度殺滅法，其SAL應<=10（-12）。熱穩定性較差產(chǎn)品的標準滅菌時(shí)間F。［指當滅菌溫度為121℃，生物指示菌的耐熱參數D值為1min，滅菌溫度系數Z值為10.0℃時(shí)的標準滅菌時(shí)間（121℃下計算的微生物等效滅活率）］一般不低于8min，如產(chǎn)品的熱穩定性很差時(shí)，可允許濕熱滅菌的F。低于8min，此情況下，應在生產(chǎn)全過(guò)程中，對產(chǎn)品中污染的微生物嚴加監控，并采取各種措施降低微生物污染水平，確保被滅菌產(chǎn)品達到無(wú)菌保證要求。
采用濕熱滅菌時(shí)，被滅菌物品應有適當的包裝和裝載方式，不能排列過(guò)密，以保證滅菌的有效性和均一性。
濕熱滅菌工藝驗證時(shí)，應進(jìn)行熱分布試驗、熱穿透試驗和生物指示劑驗證試驗。以確定滅菌柜空載及不同裝載時(shí)腔室中的熱分布狀況及可能存在的冷點(diǎn)；在空載條件下，確認121℃時(shí)腔室各點(diǎn)的溫度差值應<1℃；使用插入實(shí)際物品或模擬物品內的溫度探頭，確認滅菌柜在不同裝載時(shí)，最冷點(diǎn)物品的標準滅菌時(shí)間（F。）達到設定的標準；用生物指示劑進(jìn)一步確認在不同裝載時(shí)冷點(diǎn)處的滅菌物品達到無(wú)菌保證水平。本法常用的生物指示劑為嗜熱脂肪芽孢桿菌孢子。
1、熱分布試驗的操作：空載狀態(tài)下的熱分布試驗：
①整個(gè)滅菌腔室內的溫度探頭應均勻分布，將水平和垂直區均覆蓋在內；
②說(shuō)明溫度探頭在腔室內的數量及位置，并有圖示；
③在排水口處，在靠近設備本身的溫度傳感/控制器的位置，應再放置一支探頭；
④在滅菌溫度穩定期，各處溫度應基本保持一致（如各點(diǎn)之間的溫度差在1℃范圍內）；
⑤重復試驗至少3次，以證明在該工藝條件下的溫度均一性、重現性、并且與規定標準相符；
⑥每種裝載方式下的熱分布試驗；
⑦在產(chǎn)品容器內以及腔室均勻放置測溫探頭以確定在裝載狀態(tài)下升溫緩慢的位置。此試驗應在最大和最小裝載方式下分別進(jìn)行。
測定不同裝載方式對產(chǎn)品的熱力學(xué)效果的影響，通過(guò)實(shí)驗應得到以下參數：
①保溫階段的最高和最低溫度（溫度范圍）及平均溫度；②最小和最大F。值；③保溫時(shí)間。復試驗裝載3次，以證明在該工藝條件下的溫度均一性、重現性、并且與規定標準相符。
2、熱穿透試驗：通過(guò)在產(chǎn)品容器內均勻分布測溫探頭以確定在滅菌時(shí)相應裝載方式下的冷點(diǎn)。應分別在最大和最小裝載方式下進(jìn)行此試驗，以確定不同裝載方式對被滅菌物品的熱力學(xué)效果的影響，通過(guò)實(shí)驗應能獲得如下數據：各點(diǎn)間的最大和最低溫度（溫度范圍）保溫階段各點(diǎn)的平均溫度、各點(diǎn)的最小及最大F。值、以及各點(diǎn)的保溫時(shí)間。
通過(guò)熱穿透試驗應達到以下目的：①測試數據應證明，在滅菌保溫階段整個(gè)腔室內各容器內的溫度應不超過(guò)士1℃，各容器內溫度之間的最大溫差應不超過(guò)2℃；②根據滅菌參數確定合適的產(chǎn)品滅菌程序；③至少連續運行3次，以確保設定滅菌程序的穩定性和可靠性。
對于腸外用大輸液產(chǎn)品及高黏性的液體產(chǎn)品，必須對容器內的冷點(diǎn)進(jìn)行測試?？稍谌萜鲀炔贾?&mdash;3個(gè)溫度探頭（插在不同的深度位置）來(lái)獲得此方面的數據，對旋轉滅菌器可以不用考慮容器內的冷點(diǎn)。
用相同的方法對于干熱滅菌設備進(jìn)行驗證試驗，但在保溫期間各點(diǎn)間的溫度差較濕熱的要大，如在強制對流式或隧道式干熱滅菌條件下，各點(diǎn)間溫差會(huì )達到士15℃。另外，與濕熱滅菌相比，干熱滅菌設備內不同類(lèi)別的裝載物及其裝載方式，對熱穿透效果的影響要大得多。